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湖北BA ELISA***盒-武汉默沙克

发布时间:2019-11-25 20:08:17        






***的准备

按***盒说明书的要求准备实验中需用的***。ELISA中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液、洗涤液应用pH计测量。从冰箱中取出的试验用***应待温度与室温平衡后使用,一般室温平衡不低于30min。***盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。



加样

在ELISA中一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。加样时应将所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡。

加标本一般用微量加样器,按规定的量加入板孔中。每次加标本应更换吸嘴,以免发生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加样(一般不建议使用)。有些指标检测(如间接法ELISA)需用稀释的血1清,可在试管中按规定的稀释度稀释后再加样。也可在板孔中加入稀释液,再在其中加入血1清标本,然后在微型震荡器上震荡1min。加酶结合物工作液和底物工作液时可用多道移液器,使加液过程在***1短时间内完成。


 类风1湿因子(RF)同样能干扰捕获包被法测定IgM抗1体,导致假阳性反应。因此中和IgG的间接法近来颇受青睐,用这类***检测抗CMV IgGM和抗弓形虫IgM抗1体已获成功。

  2.2.7 ABS-ELISA法

  ABS为亲和素(***idin)生物素(biotin)系统(system)的略语。亲和素是一种糖蛋白,分子量60000,每个分子由4个能和生物素结合的亚基组成。生物素为小分子化合物,分子量244。用化学方法制成的衍生物素-羟基琥珀酰亚1胺酯可与蛋白质和糖等多种类型的大小分子形成生物素标记产物,标记方法颇为简便。生物素与亲和素的结合具有很强的特异性,其亲和力较抗原抗1体反应大得多,两者一经结合就极为稳定。由于一个亲和素可与4个生物素分子结合,因此如把ABS与ELISA法可分为酶标记亲和素-生物素(LAB)法和桥联亲和素-生物素(ABC)法两种类型。两者均以生物素标记的抗1体(或抗原)代替原ELISA系统中的酶标抗1体(抗原)。在LAB中,固相生物素先与不标记的亲和素反应,然后再加酶标记的生物素以进一步提高敏感度。在早期,亲和素从蛋清中提取,这种卵亲和素为碱性糖蛋白,与聚本乙烯载体的吸附性很强,用于ELISA中可使本底增1高。从链霉菌中提取的链霉亲和素则无此缺点,在ELISA应用中有替代前者的趋势。由于ABS-ELISA较普通ELISA多用了两种***,增加了操作步骤,在临床检验中ABS-ELISA应用不多。


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酶标比色仪简称酶1标仪,通常指专用于测读ELISA结果吸光度的光度计。针对固相载体形式的不同,各有特1制的适用于板、珠和小试管的设计。许多***公司配套供应酶标1仪。酶标1仪的主要性能指标有:测读速度、读数的准确性、重复性、精1确度和可测范围、线性等等。优良的酶标1仪的读数一般可精1确到0.0 01,准确性为±1%,重复性达0.5%。举例说,若某孔测得的A值为1.083,则该孔相对于空气的真实A值应为1.083± 0.01(1.073~1.093),重复测定数次,其A值均应1.083±0.05(1.078~1.088)在之间。酶1标仪的可测范围视各酶标1仪的性能而不同。普通的酶标1仪在0.000~2.000,新型号的酶标1仪上限拓宽达2.900,甚至更高。超出可测上限的A值常以'*'或'over'或其它符号表示。应注意可测范围与线性范围的不同,BA ELISA***盒,线性范围常小于可测范围,比如某一酶标1仪的可测范围为0.000~2.900,而其线性范围仅0.000~2.000,这在定量ELISA中制作标准曲线时应予注意。




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