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武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。

3、染色弱 原因 解决办法 抗1体浓度过低，孵育时间过短 提高抗1体浓度，孵育时间不能少于60分钟 ***超过有效使用期 及时更换*** 操作中，滴加***时缓冲液未沥干，致 使***稀释 每步滴加***前沥干切片中多余的缓冲液（但防止切片干燥） 室温太低，低于15℃ 若室温低于15度，要改放在37℃孵育箱孵育30-60分钟（或4℃冰 箱过夜） 蛋白封闭过度 封闭时间不要超过10分钟 4、染色阴性 原因 解决办法 操作步骤错误 重新试验，设立阳性对照 ***中无抗原 设立阳性对照片，以验证实验结果 一抗与二抗种属连接错误 仔细确定一抗与二抗种属无误

（1）分子结构不同：BNP的分子结构中有一个非常重要的二硫键连接构成的环状结构，可与钠尿肽受体结合发挥生物学活性作用；NT-proBNP为一直链结构，是失去生物活性的氨基酸片段。

（2）在体内的清除途径不同：BNP的清除主要通过与钠尿肽清除受体（NPR-C）结合继而被胞吞和溶酶体降解，只有少量的BNP通过1脏清除，当1功能缺失时，中性肽链内切酶（NEP）也可打开BNP的环状结构而对它进行清除；⑦切成的蜡带到20-750px长时，右手用另一支毛笔轻轻将蜡带挑起，以免卷曲，并牵引成带，平放在蜡带盒上，靠刀面的一面较光滑，朝下，较皱的一面朝上。NT-proBNP清除的唯1途径是小球滤过，1功能出现缺失对NT-proBNP的代谢影响极大。

【储存条件及有效期】

储存条件：2到8℃保存，避光。

有效期：12个月。

【自备仪器】

酶1标仪，移液器

【使用方法】

1、待样品孔中加完HRP结合物并温育一定时间后，洗板3-5次，每孔加入底物显色液A，显色液B各50 μL（A、B液先混合再加入孔中），轻轻混匀，在37°C下温育10-30分钟。

2、每孔加入终止液，15 min内在450 nm波长处测定各孔溶液的OD值。

6．透蜡

放入二甲本和石蜡各半的混合液60min，再放入石蜡Ⅰ60分钟、石蜡Ⅱ透蜡30分钟。

透蜡的目的是除去***中的透明剂（如二甲本等），使石蜡渗透到***内部达到饱和程度以便包埋。透蜡时间根据***大小而定。透蜡应在恒温箱内进行，并保持箱内温度在55-60℃左右，注意温度不要过高，以免***发脆。一般置于恒温箱0.5h。

透蜡注意事项

（1）尽量保持在较低温度中进行，以石蜡不凝固为度；

（2）透蜡温度要恒定，不可忽高忽低；

（3）操作要迅速，力求在1短的时间内完成石蜡透入过程，以免引起***变硬、变脆、收缩等。