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6.***样本如何处理？

用预冷的PSB (0.01M,pH=7.4)冲洗***，以去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将***剪碎。将剪碎的***与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的***样本对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑1制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解***细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。后将匀浆液于5000×g 离心5~10分钟，取上清检测。由于乙醇与石蜡不相溶，而二甲本既能溶于乙醇又能溶于石蜡，所以脱水后还要经过二甲本以过渡。

IgG可被木瓜蛋白酶分解为三个区段，其中两个相同的区段称抗原结合片段（Fab）。每个Fab都保存结合抗原的能力，但只有一个抗原结合位点，是单价的，与抗原结合后不出现凝集或沉淀。另一区段称Fc段，无抗1体活性，但具有IgG特有的抗原性。

IgG可被胃蛋白酶分解为两个片段，一个Fab双体，称F（ab'）2，能和两个相同的抗原结合；另一片段类似Fc，随后被分解成小分子多肽，无生物活性。

IgM是由五个单体组成的五聚体，含 10个重链和10个轻链，具有10个抗原结合价，由于空间位置的影响，只表现为五个抗原结合价。IgM分子量约为900000，IgG分子量约为150000。

但是这种特异性也不是绝1对的。假使两种化合物有着部分相同的结构，在抗原抗1体反应中可出现交叉反应。例如：绒毛膜促性1腺激1素（hCG）和黄体生成激1素（LH）均由α和β两个亚单位组成，其结构的不同处在β亚单位，而两者的α亚单位是同类的。全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟。用hCG***动物所得的抗血1清中含有抗α-hCG和抗β-hCG两种抗1体，抗α-hCG抗1体将与LH中的

α酶位发生交叉反应。在临床检验中，如用抗hCG抗血1清作为妊1娠诊1断***检定尿液中hCG，只能用于hCG浓度较高的试验，否则妇女生理性排泄入尿液中的微量LH将与之发生交叉反应。因此在作为早1孕诊断（敏感度应达到50mIu/mlhCG）的实际中必须应用只对hCG特异的抗β-hCG，以避免与其它激1素的交叉反应的发生。假使两种化合物有着部分相同的结构，在抗原抗1体反应中可出现交叉反应。

　双抗1体夹心法是检测抗原1常用的方法，操作步骤如下：

　　1）将特异性抗1体与固相载体联结，形成固相抗1体。洗涤除去未结合的抗1体及杂质。

　　2）加受检标本，保温反应。标本中的抗原与固相抗1体结合，形成固相抗原抗1体复合物。洗涤除去其他未结合物质。

　　3）加酶标抗1体，保温反应。固相***复合物上的抗原与酶标抗1体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗1体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。