武汉EGF ELISA***盒-武汉默沙克

武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。

ELISA***盒操作步骤

1. 加样：标准品设定5个浓度点10个孔，每个浓度设定平行孔，加入50微升不同浓度的标准品，空白孔设定1个孔加入50微升蒸馏水（空白对照孔不加样品及酶标***，其余各步操作相同）、待测样品孔，在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品***终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

2. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

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机体被微生物感1染后，先产生IgM抗1体，然后产生IgG抗1体。经过一段时间，IgM抗1体量逐渐减少而消失，而IgG抗1体可长期存在，在***痊愈后可持续数年之久。

IgM抗1体一般为保护性抗1体具有***性。因此IgM抗1体的测定，对某些传1染病如甲型肝1炎有较高的临床诊断价值。右图为为甲型肝1炎病1人血1清中IgG抗1体和IgM抗1体出现的时间和水平。

1.3　抗原抗1体反应

1.3.1　可逆性

抗原与抗1体结合形成抗原抗1体复合物的过程是一种动态平衡，其反应式为：

Ag Ab→Ag·Ab

抗1体的亲和力（affinity）是抗原抗1体间的固有结合力，可以用平衡常数K表示：

K=[Ag·Ab]／[Ag][Ab]

Ag·Ab的解离程度与K值有关。高亲和力抗1体的抗原结合点与抗原的决定簇在空间构型上非常适合，两者结合牢固，不易解离。解离后的抗原或抗1体均能保持原有的结构和活性，因此可用亲和层析法来提纯抗原或抗1体。在抗血1清中，特异性的IgG抗1体仅占总IgG中的极1小部分。用亲和层析法提取的特异性抗1体，称为亲和层析纯抗1体，应用于***测定中可得到更好的效果。

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　双抗1体夹心法是检测抗原***1常用的方法，EGF ELISA***盒，操作步骤如下：

　　1）将特异性抗1体与固相载体联结，形成固相抗1体。洗涤除去未结合的抗1体及杂质。

　　2）加受检标本，保温反应。标本中的抗原与固相抗1体结合，形成固相抗原抗1体复合物。洗涤除去其他未结合物质。

　　3）加酶标抗1体，保温反应。固相***复合物上的抗原与酶标抗1体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗1体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。

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