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武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。

6.***样本如何处理？

用预冷的PSB (0.01M,pH=7.4)冲洗***，以去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将***剪碎。将剪碎的***与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的***样本对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑1制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解***细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。***后将匀浆液于5000×g 离心5~10分钟，取上清检测。确定抗1生素毒性水平后，使用低于毒性浓度2～3倍浓度的抗1生素的培养液培养细胞2～3代。

1.3.2　***适比例

在恒定量的抗1体中加入递增量的抗原形成抗1体复合物（沉淀）的量见图1-4。曲线的高峰部分是抗原抗1体比例合适的范围，称为等价带（zone ofequivalence）。在等价带前后分别为抗1体过剩带和抗原过剩带。如果抗原或抗1体极度过剩，则无沉淀物形成，在***测定中称为带现象（zone phenomenon）。抗1体过量称为前带（prezone），抗原地过量称为后带（p1ostzone）。在用***学方法测定抗原时，应使反应系统中有足够的抗1体量，否则测得的量会小于实际含量，甚至出现假阴性。在2001年修订的欧洲心脏病学会心衰诊疗指南中，已经把脑钠肽作为心衰诊断的工具。

假使在被测分子的不同位点上含有多个相同的决定簇，例如HBsAg的a决定簇，也可用针对此决定的同一单抗分别包被固相和制备酶结合物。但在HBsAg的检测中应注意亚型问题，HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4个亚型，虽然每种亚型均有相同的a决定簇的反应性，这也是用单抗作夹心法应注意的问题。Elisa生物试验是一种敏***高，特异性强，重复性好的实验诊断方法。

　　双抗1体夹心法测抗原的另一注意点是类风1湿因子（RF）的干扰。室温高时促进染色，染色时间可短些，否则可适当延长时间，冬季室温低时可放入恒温箱中染色。RF是一种自身抗1体，多为IgM型，能和多种动物IgG的Fc段结合。用作双抗1体夹心法检测的血1清标本中如含有RF，它可充当抗原成份，同时与固相抗1体和酶标抗1体结合，表现出假阳性反应。采用F（ab'）或Fab片段作酶结合物的***，由于去除了Fc段，从而消除RF的干扰。双抗1体夹心法ELISA***是否受RF的影响，已被列为这类***的一项考核指标（参见6.2）。

　　双抗1体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原，但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原，因其不能形成两位点夹心。